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LowCross-Buffer®常见问题解答

发布时间:2019-08-23 浏览量: 1583
LowCross-Buffer作为一种实验缓冲液,它能够有效地阻止包括由HAMA引起的大量干扰因素的影响,所以LowCross-Buffer可以作为HAMA阻断剂。

问题一:

在过氧化物标记的双夹心elisa实验中得到的背景值较高,原因是什么?LowCross-Buffer®能起到什么作用吗?

答复:了解二抗能否与其他哺乳动物的抗体结合是非常重要的。除非是高度纯化的抗体,抗兔lgG的二抗也能够与鼠lgG,山羊lgG结合,原因是哺乳动物抗体的高度同源性,不经过纯化(预吸附)的二抗可以与其他抗体进行高亲和性的交叉反应,这种情况下,LowCross-Buffer起不到作用,二抗必须不能与捕获抗体结合,例如,Biotrend可以提供各类避免此类交叉反应的预吸附抗体。 

问题二:

我需要对LowCross-Buffer®进行稀释吗?

答复:是即用型的。样品或检测抗体直接用此稀释,仅仅在竞争性实验或一些免疫组化实验中,可以用水或一些生理缓冲液对其进行稀释。在这种情况下,实验者要通过测试找到合适的比例。 

问题三:

LowCross-Buffer®会对酶标检测的显色反应产生影响吗?

答复:LowCross-Buffer®不会使碱性磷酸酶或过氧化物酶活性减弱。

有的用户把酶标检测抗体在LowCross-Buffer®孵育后会检测到酶活性的增强。 

问题四:

LowCross Buffer®能用在荧光物质结合物中吗?比如在蛋白芯片实验中。

答复:是的,可以用在蛋白芯片中。对于青染料(如Cy5, Cy3,),有的实验中可观察到荧光量的增强。 

问题五:

可以用于抗体或多克隆抗体吗

答复:可以,不过在使用多抗时,要注意到多抗中含有亲和力不同的多种抗体,LowCross-Buffer®仅允许高亲和性的抗体结合而消除低亲和性的结合。使用LowCross-Buffer®时可适当增加多抗的浓度,因为抗体浓度的增加也是高亲和性抗体浓度的增加,同时LowCross-Buffer®抑制低亲和性结合。但是不是要加大抗体的浓度还要取决于抗体的纯度。 

问题六:

LowCross-Buffer®可以反复冻融吗?

答复:反复冻融几次不会有影响,但是在使用前要充分混匀。 

问题七:

为什么LowCross-Buffer®能减少交叉反应?

答复:我们所说的基质效应一般是一些基质成分(如人血清标本中的血清蛋白)的与分析物或抗体的低亲和性结合。分析物会被标本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能与抗体结合,抗体也可以被基质掩蔽。LowCross-Buffer®可以减少基质对抗体的掩蔽。 

问题八:

LowCross-Buffer®可以用在哪些方面?

答复:LowCross-Buffer®是一种新的用于免疫实验(如ELISAWB、蛋白芯片和免疫-PCR)的样本缓冲液,有助于减少干扰作用,如非特异性结合,交叉反应和基质效应,抗原抗体的高亲和结合不会被减弱。 

问题九

LowCross-Buffer®能替代表面封闭液吗?

答复:不行,LowCross-Buffer®不是表面封闭液,你可以用它稀释样本和抗体,我们推荐使用CANDOR的封闭液,能起到很好的封闭作用。