LowCross-Buffer®常见问题解答

问题一：

在过氧化物标记的双夹心elisa实验中得到的背景值较高，原因是什么？LowCross-Buffer®能起到什么作用吗？

答复：了解二抗能否与其他哺乳动物的抗体结合是非常重要的。除非是高度纯化的抗体，抗兔lgG的二抗也能够与鼠lgG，山羊lgG结合，原因是哺乳动物抗体的高度同源性，不经过纯化（预吸附）的二抗可以与其他抗体进行高亲和性的交叉反应，这种情况下，LowCross-Buffer起不到作用，二抗必须不能与捕获抗体结合，例如，Biotrend可以提供各类避免此类交叉反应的预吸附抗体。 

问题二：

我需要对LowCross-Buffer®进行稀释吗？

答复：是即用型的。样品或检测抗体直接用此稀释，仅仅在竞争性实验或一些免疫组化实验中，可以用水或一些生理缓冲液对其进行稀释。在这种情况下，实验者要通过测试找到合适的比例。 

问题三：

LowCross-Buffer®会对酶标检测的显色反应产生影响吗？

答复：LowCross-Buffer®不会使碱性磷酸酶或过氧化物酶活性减弱。

有的用户把酶标检测抗体在LowCross-Buffer®孵育后会检测到酶活性的增强。 

问题四：

LowCross Buffer®能用在荧光物质结合物中吗？比如在蛋白芯片实验中。

答复：是的，可以用在蛋白芯片中。对于青染料（如Cy5, Cy3，），有的实验中可观察到荧光量的增强。 

问题五：

可以用于抗体或多克隆抗体吗

答复：可以，不过在使用多抗时，要注意到多抗中含有亲和力不同的多种抗体，LowCross-Buffer®仅允许高亲和性的抗体结合而消除低亲和性的结合。使用LowCross-Buffer®时可适当增加多抗的浓度，因为抗体浓度的增加也是高亲和性抗体浓度的增加，同时LowCross-Buffer®抑制低亲和性结合。但是不是要加大抗体的浓度还要取决于抗体的纯度。 

问题六：

LowCross-Buffer®可以反复冻融吗？

答复：反复冻融几次不会有影响，但是在使用前要充分混匀。 

问题七：

为什么LowCross-Buffer®能减少交叉反应？

答复：我们所说的基质效应一般是一些基质成分（如人血清标本中的血清蛋白）的与分析物或抗体的低亲和性结合。分析物会被标本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能与抗体结合，抗体也可以被基质掩蔽。LowCross-Buffer®可以减少基质对抗体的掩蔽。 

问题八：

LowCross-Buffer®可以用在哪些方面？

答复：LowCross-Buffer®是一种新的用于免疫实验（如ELISA、WB、蛋白芯片和免疫-PCR）的样本缓冲液，有助于减少干扰作用，如非特异性结合，交叉反应和基质效应，抗原抗体的高亲和结合不会被减弱。 

问题九

LowCross-Buffer®能替代表面封闭液吗？

答复:不行，LowCross-Buffer®不是表面封闭液，你可以用它稀释样本和抗体，我们推荐使用CANDOR的封闭液，能起到很好的封闭作用。